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红细胞酶测定
概述
红细胞酶在调节红细胞代谢中起重要作用,酶缺乏可导致能量供应减少,缩短红细胞寿命,引起溶血性疾病,临床上最重要的酶缺乏病是葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏和丙酮酸激酶缺乏。红细胞酶测定对诊断酶缺乏病具有重要作用。
检查前准备
准备好混合试剂,置-20℃冰箱内保存,保存数月。
操作方法
1.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的荧光斑点试验
(1)标本采集:乙二胺乙酸二钠(EDTA-Na),ACD(枸缘酸、枸缘酸三钠、葡萄糖)或肝素抗凝全血,若放4℃保存,可稳定1周;也可用肝素化毛细管从手指或足跟采取末梢血液。
(2)取3支小试管,标明患者、正常对照和阳性对照,向各管加入0.2ml混合试剂。分别向各管加入患者、正常和阳性的抗凝全血0.02ml,混匀后室温放置。
(3)在反应0分钟、5分钟、10分钟后,分别从各管吸出反应液1滴,置于新华1号滤纸上,使充分干燥。
(4)在暗室内,用紫外线照射滤纸上的斑点,检查是否有荧光。
2.丙酮酸激酶的荧光斑点试验
(1)用肝素、EDTA或ACD抗凝患者和正常人血。
(2)以1000 r/min离心沉淀5分钟,吸弃血浆和白细胞层。用生理盐水配成20%的红细胞悬液。
(3)取2支试管,分别加入0.2ml混合试剂,并加入患者和对照红细胞悬液0.02ml,混匀,置于37℃水浴中。
(4)试液反应0分钟、10分钟、20分钟、30分钟、60分钟后,分别取患者和对照的微量反应液,在1号滤纸上点样。
(5)在紫外灯下观察结果。
参考范围
1.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的荧光斑点试验
(1)正常人:0分钟斑点无荧光,5分钟和10分钟斑点出现荧光,而10分钟斑点荧光最强。
(2)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶部分缺陷者:5~10分钟均出现很弱荧光。
(3)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏者:在5~10分钟甚至10分钟后均无荧光。
2.丙酮酸激酶的荧光斑点试验
正常人荧光在30分钟以后逐渐减少,甚至消失。
临床意义
1.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺陷见于蚕豆病和伯氨喹啉型药物性溶血贫血等。
2.丙酮酸激酶缺陷者荧光不消失或时间延长说明丙酮酸激酶缺乏,丙酮酸激酶缺乏症
百科内容仅供医学科普使用,不能作为诊断治疗依据,具体请遵医嘱。
目录
概述
检查前准备
操作方法
参考范围
临床意义
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